O que é o Gel Eletroforese equipamentos utilizados para

? Ao estudar a genética, a eletroforese em gel é uma ferramenta essencial do pesquisador genético. Estudantes e pesquisadores tanto usar equipamento de eletroforese em gel de estimar ou verificar o tamanho de pares de bases de uma amostra de DNA ou para purificar uma amostra de DNA . Double-stranded DNA consiste de pares de bases de nucleotídeos . O tamanho de um fragmento de DNA está descrita por como pode pares de base que fragmento é , por exemplo, 50 pares de bases ou 100 pares de bases . Conheça a equipamentos

Gel equipamento de eletroforese consiste em uma bandeja de fundição , fundição pentes, caixa de gel , fonte de alimentação , em gel de agarose e caixa de luz UV. A bandeja de fundição e caixa de gel são feitas tanto em plexiglas ou Teflon , ambos dos quais são materiais não condutores . Quando uma corrente eléctrica é passada a partir da fonte de alimentação através de um tampão contido na caixa do gel , a corrente não transferir a partir da caixa do gel para o pesquisador . A bandeja de fundição e pentes são usados ​​para criar o gel . Bandejas Fundição vêm em vários tamanhos , assim como os pentes . Uma pequena gel pode ser usado para executar cinco ou seis amostras , enquanto um grande gel pode funcionar até 20 amostras . O pesquisador irá utilizar a caixa de luz UV em combinação com um corante luminescente para ler os resultados de um experimento de eletroforese.

Agarose Gel

O gel usado em eletroforese é feita a partir de uma solução aquecida de agarose e o tampão que é então vertida para um tabuleiro de fundição com pentes de fundição em uma extremidade . Quando esfriar , a agarose polimeriza , tornando-se um gel poroso semelhante ao Jello apenas mais pesado e mais resistente. Após o pesquisador coloca o gel na caixa de gel e cobre -a com tampão , as amostras de DNA são misturados com um corante luminescente conhecido como brometo de etídio e um espessante . O agente espessante permite que a amostra de afundar para o fundo do poço , em vez de flutuar fora para dentro da solução . A concentração de agarose , em solução , dita o tamanho dos fragmentos de ADN que podem mover-se através do gel e a rapidez . A maioria dos laboratórios utilizam um gel de agarose a 0,8 por cento, capaz de separar os fragmentos de DNA de 500 a 20,000 pares de bases . O pente fundição cria pequenos poços em uma extremidade do gel.

O Processo

DNA é uma molécula carregada negativamente . Quando a fonte de alimentação está ligado à caixa de gel , o eléctrodo negativo é colocada na mesma extremidade que a amostra de ADN , enquanto que o eléctrodo positivo está colocado na extremidade oposta da caixa de gel . À medida que a corrente flui através da solução tampão , a amostra de ADN é atraído para a corrente positiva . Quanto mais tempo a corrente atravessa o tampão , mais a amostra de DNA com o movimento através do gel. Se uma amostra contém dois ou mais tamanhos de fragmentos , os tempos de operação mais longos irá mostrar uma maior separação entre as duas bandas .

O resultado

Para ler os resultados , a gel é colocada numa caixa de luz UV . A luz ultravioleta faz com que o brometo de etídio ligado aos fragmentos de ADN a brilhar como uma faixa linear . Quanto mais brilhante e mais grosso a banda , mais DNA contido na amostra. Quando a amostra de ADN é carregado com uma corrente contendo vários tamanhos dos fragmentos conhecidos , o cientista pode estimar o tamanho aproximado do fragmento de DNA . Se o cientista está tentando separar um determinado tamanho fragmento de uma amostra mista, ele pode extirpar o gel em torno da banda e extrair o DNA mais tarde.