Como medir o pH em a enzima lactase Labs

A lactase é uma enzima que quebra o açúcar lactose em glicose e galactose no intestino delgado , rins e fígado . Um ensaio de enzima lactase é um primeiro ano experimento de laboratório de bioquímica padrão. Parte deste laboratório envolve a medição da eficiência de lactase , a vários níveis de pH para determinar o seu pH ideal . Você pode fazer isso através da mistura de diferentes soluções tampão com uma quantidade medida de lactase e seu substrato, depois de gravar a eficiência de lactase em um spectrophotometer.Things que você precisa de caneta com ponta de feltro
7 tinas espectrofotômetro
3,5 ml de ONPG ( substituto lactose)
4,5 ml de cada solução tampão : pH 2 , 4, 6 , 7, 8 , 10, 12
Pipettes espectrofotômetro
caneta esferográfica
livro Lab
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medição de pH da solução de lactose
1 não marque a janela da cuvete. Isso estraga a experiência.

Etiqueta sete tinas por número com a caneta de feltro .
2 ONPG é um substituto lactose. É o subtrate para esta reação enzimática.

Adicionar 0,5 ml de ONPG a cada cuvete usando uma pipeta limpa e seca.
3 Tome notas cuidadosas em seu livro de laboratório.

Adicione 4,5 ml de cada solução padrão em cuvetes separadas . Por exemplo : adicionar a solução tampão pH 2 em cuvetes # 1. Adicionar a solução tampão a pH 4 a cuvete # 2 . Continuar dessa maneira até que todas as tinas estão cheios . Usar uma pipeta diferente para cada solução tampão para evitar a contaminação . Claramente marcar o número de cuvete e o pH da solução tampão que contém no seu livro de laboratório .
4 caminho tão rapidamente quanto possível .

Usando uma pipeta de limpeza a seco , adicionar rapidamente 0,4 ml da enzima lactase a cada cuvete.
5 Trabalho rapidamente. A reação já começou.

Coloque as tinas no espectrofotômetro, feche a tampa e executar o ensaio de pH. Os resultados do ensaio irá dizer-lhe o pH ideal para uma reação lactase.