Como Purificar Taq

Taq polimerase é uma enzima que resistente ao calor que é utilizado para a investigação e diagnóstico médico . Cientistas extrair Taq do gene DNA polimerase Taq e utilizá-lo durante polimerase aplicações de reação em cadeia de sequenciamento de DNA. Durante tais casos , o padrão de ADN ou é estudado ou multiplicado para criar uma cadeia de ADN composta de nucleótidos . Quando a purificação de Taq , é importante para expor o extrato a temperaturas sugeridas nas time.Things corretas que você precisa
dispositivo de medição
Celsius termômetro
caldo Lauria Bertaini
recipientes de plástico ( 2)
iPig
Tris -HC1 pH 7,9
Dextrose
EDTA
detergente (sem fósforo)
lisozima
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1

Local 5 ml de caldo Lauria Bertaini num recipiente de plástico .
2

Coloque o extracto de Taq polimerase no recipiente cheio de caldo e calor durante 12 horas a 37 graus Celsius .

3

Adicionar 0,2 0,5 mM de iPIG e continuar o aquecimento a 37 graus Celsius, durante mais 12 horas .
4

mistura de 50 mM de Tris - HC1 , pH 7,9 , glicose 50 mM e 1 mM EDTA juntos em um recipiente de plástico para criar um buffer.
5

Lave a polimerase Taq com detergente , lugar no buffer e insira 4 mg /mL de lisozima .
6

Coloque o recipiente em um ambiente temperatura ambiente por cinco minutos.
7

colocar a substância em um ambiente de 75 graus Celsius por 30 minutos.
8

Retire a Taq purificada extrair e armazenar polimerase se o desejar.