O que faz Acetona Álcool fazer para uma coloração de Gram

? A coloração de Gram é um procedimento de coloração diferencial que mostra que as bactérias são Gram- positivas ou Gram -negativas com base em sua cor da mancha . Álcool acetona é um reagente utilizado neste processo para proporcionar a diferenciação de cor . Bactérias Gram-positivas possuem uma camada espessa de peptidoglicano e mancha roxa, enquanto os microrganismos Gram- negativos têm uma pouca ou nenhuma camada de peptidoglicano e rosa mancha. Primário Violet Stain -Crystal

Quando uma lâmina de amostra bacteriana é preparado , cristal violeta é usado para denegrir a primeira amostra . Neste ponto, as bactérias Gram – positivas e Gram – negativas aparece roxo . Normalmente, o cristal violeta é aplicada sobre a lâmina por 30 segundos antes de lavar qualquer mancha excesso com água. O cristal violeta pode aderir um pouco para as camadas de peptidoglicano por isso nem todos a mancha principal será lavado com água.

Mordant – Iodo

iodo é então adicionado para a amostra durante um minuto . Ele age como um mordente , que serve para fixar os corantes em um processo de coloração. Iodo executa esta função por ligação ao violeta cristal e a criação de um complexo insolúvel que adere muito melhor para a camada de peptidoglicano espessura encontrado em células bacterianas gram – positivos do que apenas só a de violeta de cristal . Não existe um passo de lavagem com água após a adição do iodo .

Descolorante – Álcool

qualquer acetona ou álcool etílico pode ser utilizada como o agente de descoloração . O álcool dissolve-se lípidos encontrados na membrana celular externa de bactérias Gram – negativas , permitindo que o complexo de iodo – violeta de cristal para vazar para fora da camada de peptidoglicano mais fino . O álcool é adicionado durante 10 a 20 segundos; é derramado no slide até que todo o iodo é lavado e segundo turno é incolor . Neste ponto do processo de coloração de Gram , bactérias Gram – negativas são incolores , enquanto as bactérias Gram – positivas ainda reter o violeta de cristal . Uma vez terminado o deslize tem de ser lavado com água para impedir o efeito de descoloração .

Contracoloração – safranina

safranina é então adicionado para aumentar a visibilidade e contraste com o incolor bactérias Gram-negativas. A mancha torna essas bactérias parecem rosa sob o microscópio. Uma vez que a mancha é adicionado ao total da amostra , também manchas bactérias Gram-positivas , bem como, mas o mais escuro do cristal violeta esconde o isqueiro safranina cor -de-rosa . Uma vez que a amostra de slides foi inundado com safranina durante cerca de um minuto , a água é utilizada para lavar o excesso mancha que não aderir às células bacterianas.