Como são as enzimas de restrição usados em Biotecnologia
? A indústria da biotecnologia emprega enzimas de restrição para mapear DNA , bem como corte e emenda -lo para uso em engenharia genética. Encontrado em bactérias , uma enzima de restrição reconhece e atribui a uma seqüência de DNA particular, e depois corta os backbones da dupla hélice . O irregular ou ” pegajoso ” termina esse resultado a partir do corte são religados pela enzima ligase , relata o Dolan DNA Learning Center . As enzimas de restrição têm levado a avanços significativos na área de biotecnologia . História Antiga
De acordo com Acesso Excelência , os cientistas Werner Arbor e Stewart Linn identificou duas enzimas que impediam o crescimento do vírus em bactérias E. coli na década de 1960 . Eles descobriram que uma das enzimas , chamado um ” nuclease de restrição , ” cut DNA em diversos pontos ao longo do comprimento da cadeia de ADN . No entanto , esta enzima cortou a molécula em locais aleatórios . Biotecnólogos estavam na necessidade de uma ferramenta que poderia cortar DNA em sites segmentados de forma consistente.
Descoberta revolucionária
Em 1968 , HO Smith, K.W. Wilcox e T.J. Kelley isolado a primeira enzima de restrição , o HindII , que repetidamente cortado moléculas de DNA em um local específico , o centro da seqüência da Universidade Johns Hopkins . Mais de 900 enzimas de restrição foram identificados entre 230 cepas de bactérias desde aquela época , de acordo com Acesso Excellence.
DNA Mapeamento
genomas de DNA podem ser mapeados através da utilização de enzimas de restrição , de acordo com a Enciclopédia de Medicina . Ao determinar a ordem dos pontos de enzimas de restrição no genoma , isto é , os locais em que a enzima ligar-se – os cientistas podem analisar o ADN . Esta técnica, conhecida como Restriction Fragment Length Polymorphism , pode ser útil para a tipagem do DNA , particularmente quando a identidade de um fragmento de DNA a partir de uma cena de crime precisa ser verificado .
Geração DNA recombinante
a utilização de enzimas de restrição é fundamental na geração de ADN recombinante , que é o entrelaçamento de fragmentos de ADN a partir de dois organismos estranhos . Na maioria dos casos , um plasmídeo ( DNA bacteriano ) é combinado com um gene a partir de um segundo organismo . Durante o processo , as enzimas de restrição irá digerir ou cortar o ADN de ambas as bactérias e outro organismo , resultando em fragmentos de DNA com extremidades compatíveis , relata a Enciclopédia Medicina . Estas extremidades são então coladas através do uso de uma outra enzima ou ligase .
Tipos de enzimas de restrição
De acordo com a Universidade de Strathclyde em Glasgow, existem três principais tipos de enzimas de restrição . Tipo I distingue uma sequência em particular ao longo da molécula de DNA, mas corta apenas uma cadeia da dupla hélice . Além disso, emite-se nucleótidos no local do corte . Outra enzima deve seguir -se ao corte da segunda cadeia de ADN . Tipo II reconhece uma sequência e fatias de ambos os filamentos de DNA em particular perto ou dentro do local de destino. Tipo III vai cortar as duas fitas de DNA a uma distância predeterminada a partir do site do reconhecimento.
