Proteína A sobre-expressão protocolo

Um protocolo superexpressão da proteína refere-se a qualquer método para obter um organismo para produzir uma proteína desejada , em quantidade suficiente para um estudo adicional . Os cientistas costumam usar bactérias e leveduras para fazer sua proteína específica de interesse, mas , em teoria, qualquer organismo poderia funcionar. Significado

Para estudar a estrutura ou a função de uma proteína particular, você precisa ter uma quantidade significativa disponível para os testes desejados. Algumas proteínas ocorrem naturalmente em grandes quantidades e purificar facilmente a partir de seu organismo hospedeiro . A maioria das proteínas , no entanto , ocorrer em quantidades muito pequenas ou em que ocorrem em organismos a partir dos quais as proteínas não podem ser facilmente purificadas . Protocolos superexpressão da proteína gerar grandes quantidades de proteínas desejadas para um estudo mais aprofundado , permitindo aos cientistas estudar baixa quantidade, proteínas raros, tóxicos e até mesmo mutantes.

Protein Expression

comum organismos utilizados em protocolos de superexpressão incluem bactérias ou leveduras . Os cientistas manipular estes organismos para transportar um gene que codifica para uma proteína desejada . Eles colocam o gene sob o controlo específico de modo a que o organismo não expressa ou produzir a proteína desejada até especificamente induzido a fazê-lo . Por exemplo , os cientistas podem projetar um organismo para transportar um gene sob o controle direto de um açúcar específico. Na ausência do referido açúcar específico , o organismo cresce , mas não pode fazer a proteína . Na presença do açúcar , o organismo vai fazer um monte de proteína.

Considerações

Muitos protocolos superexpressão diferentes funcionar, mas deve ser otimizado para uma proteína e organismo específicos . Optimização geralmente requer de tentativa e erro e muitas vezes depende da estrutura e função da proteína . A sobre-expressão de algumas proteínas podem matar o organismo tornando a proteína . Neste caso , pode ser necessário esperar até que a população do organismo crescer o suficiente antes de induzir a produção dessa proteína. Mudando organismos ou alterar tipos do mesmo organismo pode também ajudar.