GTE Tampão Usa

experiências Biotechnology envolvendo a extracção de ADN a partir de plasmídeos de exigir a utilização de um tampão chamado Glicose – Tris- EDTA , abreviado como GTE . Este tampão é uma solução estéril contendo glucose , tris ( hidroximetil ) amino metano e de ácido etilenodiaminotetracético . As células bacterianas isoladas são suspensas em tampão de GTE antes de ser lisadas para colher o DNA de plasmídeo que contêm. Solução GTE buffers o meio de isolamento , ajuda a manter a osmolaridade e liga cátions bivalentes que podem interferir com o isolamento process.Maintains Osmolarity

Se as células lise prematuramente durante o processo de isolamento do DNA , que leva à degradação do ADN e tem um efeito adverso sobre o rendimento . O teor de glicose em tampão GTE ajuda a manter a osmolaridade do meio de isolamento . Como resultado , a concentração do soluto no exterior das células de plasmídeos que imita dentro das células e previne a ruptura . Ao contrário de outros sais com propriedades semelhantes , a glicose não é um eletrólito e, portanto, não causa uma mudança na capacidade de tamponamento da solução.

Buffers isolamento Médio

Tampões são soluções que resistem pequenas alterações no pH da mistura de reacção . Em experiências que envolvem o isolamento de biotecnologia de DNA de plasmídeos , que é importante para manter o pH da solução a 8,0 . Este pH é ideal para evitar que o DNA de plasmídeo a partir de degradação por hidrólise ácida . Inibe também outras reacções indesejáveis ​​dentro componentes celulares que possam interferir com a estabilidade do ADN . Tris (hidroximetil ) amino metano ajuda a manter o nível de pH desejado .

Vinculado bivalente cátions

Certas enzimas nuclease presentes dentro da célula tem o potencial para degradar DNA . Estas enzimas requerem a presença de catiões divalentes tais como cálcio , zinco e magnésio, tal como co-factores para trazer as reacções de degradação . O EDTA presente no tampão GTE liga estes catiões bivalentes . Isso impede a acção das enzimas e ajuda a obter a nuclease de ADN intacta no final do processo de isolamento .

Usando GTE

GTE está disponível como uma solução estéril de grau de biotecnologia . Ele é um líquido incolor , com um pH de 8,0 e deve ser armazenado frio . Certifique-se de aquecer o tampão à temperatura ambiente antes de abrir o recipiente. Siga a técnica asséptica , quando da manipulação do tampão para evitar o crescimento de bactérias no meio de isolamento . Estude as instruções de uso e de segurança do fabricante antes de usar esta solução.