Como se preparar placas LB Agar

LB ágar ( Luria Bertani ) é um meio nutriente não seletivo usado para cultivar uma grande variedade de microorganismos nonfastidious . Agar tem excelentes propriedades favoráveis ​​ao trabalho de laboratório , incluindo a sua alta temperatura de fusão ( 100 graus C) , e é o meio mais utilizado na classrooms.Things microbiologia que você precisa

um litro cilindro graduado

500 ml de água destilada

balança e pesar barcos

20 g pré-misturada LB agar ou :

5 g Tryptone extrato de carne

2,5 g de extrato de levedura

5 g de NaCl ( sal de mesa)

7,5 g agar

1 litro Erlenmeyer

haste de agitação magnética

Agitando chapa quente

folha de alumínio

fita Autoclave

Forno luvas

Autoclave

placas de Petri estéril

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1

Adicionar 20 g de agar LB pré-misturada , ou 5 g de triptona , 2,5 g de fermento , 5 g de NaCl e 7,5 g de agar para a proveta graduada . Adicione água destilada até um volume total de 500 mL . Misturar isso tanto quanto possível e despeje no Erlenmeyer de 1 litro.

2

Adicione uma haste de agitação magnética e colocar o balão na chapa quente agitação. Deixe ferver e mexa por 1 minuto para dissolver completamente os ingredientes em pó .

3

Cap frasco vagamente com um pedaço de papel alumínio e rotulá-la com fita de autoclave ( colocar a fita do outro lado a parte superior da folha e para baixo dois lados do balão – cerca de dois centímetros , solto o suficiente para permitir que o vapor escape )

4

Use as luvas de forno e colocar o balão na sua panela com autoclave . cerca de meia polegada de água no fundo (por instruções para a sua máquina) . Autoclave por 20 minutos no ajuste líquido.

5

Coloque as luvas de forno para retirar o balão autoclavado de agar e deixe esfriar para cerca de 55 graus C ( ao toque da mão ) .

6

Prepare suas placas de Petri para derramar . Retirar as placas estéreis da sua embalagem , retendo a bolsa para uso posterior . Na borda da parte inferior de cada placa , use um marcador permanente para classificá-los como ” LB “.

7

Despeje as placas , levantando cada tampa apenas o suficiente para derramar em 10 a 15 mL de agar . Agitar suavemente para certificar-se da parte inferior da placa é coberta , mas não tanto que você causar bolhas para formar.

8

Deixe descansar pelo menos meia hora para esfriar completamente .

9

Virar as placas mais ( agar para cima ) e coloque de volta no seu saco original para armazenamento refrigerado ( rotular o saco ” LB” ) .