Deméritos do Método Plate Count

No método de contagem em placa , uma cultura microbiana , é introduzida num meio nutriente . Após um período de incubação , cada célula microbiana divide para formar uma colónia visível como uma pequena zona . Essas células são chamadas de unidades formadoras de colónias ( CFUs ) e uma contagem destas zonas fornece informações sobre carga microbiana da amostra. Embora este método é valioso porque determina apenas o número de organismos viáveis ​​, também tem algumas desvantagens . A necessidade de pré-tratamento

Se prato directamente de uma cultura bacteriana , o número de células que crescem na placa são demasiado grandes para permitir a contagem . Portanto, é importante o uso de um processo de diluição em série para assegurar que o número de colónias na placa é de cerca de 300 a 500 . Em alguns casos , tais como amostras de água altamente purificada , que pode ser muito poucos organismos presentes na amostra . Estas amostras devem ser concentrados antes de serem plaqueadas para contagem.

Crescimento insuficiente Condições

A placa fornece um meio nutriente para o crescimento de microorganismos riscadas sobre ele . Todos os organismos , portanto, recebem os mesmos nutrientes. Enquanto isso é bom para as culturas que consistem em um único organismo , ele coloca um problema no caso de culturas mistas . Os diferentes organismos presentes dentro de uma cultura mista podem diferir quantitativa e qualitativamente em suas necessidades nutricionais. Quando uma tal cultura cresce , as células que não recebem nutrição suficientes não crescem e se multiplicam . Portanto, embora os organismos estão presentes na cultura, seus números não refletem na contagem em placas .

Amostragem de erro quando tenta

A precisão da contagem em placas depende de uma distribuição uniforme dos organismos na superfície da placa de agar . Se estas células são distribuídos de forma desigual sobre a superfície , que provoca erros na contagem obtida . Por exemplo , em algumas espécies , organismos podem ocorrer células não como individuais, mas sim como cachos , pares ou pacotes . Portanto, o pressuposto da contagem em placas que cada colônia surgiu a partir de uma única célula é errônea e população estimada de organismos é muito menos do que os verdadeiros níveis.

Método Erros

Antes de plaqueamento , a cultura é tornada suficientemente diluído para permitir o isolamento de células separadas na placa . Um erro neste processo de diluição tem um grande impacto sobre a contagem final placa viável. A temperatura de incubação e tempo também são fatores críticos porque os organismos diferem em sua temperatura de incubação ideal e período. No caso de culturas mistas , onde há uma grande diferença entre esses valores entre os organismos , não pode haver crescimento insuficiente de uma determinada espécie, levando a um erro.

Demorado

Após plaqueamento a cultura , as placas de ágar são incubadas para permitir que as colónias se desenvolvam. Este período de incubação pode variar de dias ou semanas , dependendo da natureza dos organismos . Em certos casos , os resultados obtidos ao fim deste período podem não ter qualquer valor prático . Por exemplo, usando contagens para o monitoramento do meio ambiente , em uma unidade de fabricação estéril parenteral não tem benefícios em tempo real , embora seja de valor em acompanhar as tendências da carga microbiana da área.