Técnicas de Separação de Colóides e Eletroforese
Eletroforese , também chamado de cataforese , é um processo electrokinetic descoberto pela primeira vez em 1807 pelo cientista alemão Ferdinand Friedrich Reuss , depois de trabalhar com a influência de corrente contínua em soluções de água . A técnica utilizada para separar as moléculas carregadas numa matriz uniforme , tem sido utilizado por biólogos moleculares e outros investigadores desde então. Os métodos clássicos de electroforese em gel e electroforese capilar – ambos os quais utilizam UV e /ou marcação fluorescente para análise , estão agora unidos por dieletroforese – um método mais recente que não necessita de rotulagem . Colóides , Matrix e Separação
Um colóide é um outro nome para uma mistura cujas partículas são muito pequenas para serem vistas a olho nu, mas grande demais para ser moléculas. Em termos de electroforese , o colóide é referido como a matriz – a solução que também contém partículas a serem separadas . No caso de electroforese em gel , a matriz é constituída por uma mistura de gel de agarose e as moléculas que estão sendo separados .
Gel Electrophoresis
Esta técnica electroforética clássica utiliza uma agarose gel para migrar as partículas carregadas de ADN de diferentes tamanhos . Porque o ADN tem carga negativa , que se move através da matriz de gel , quando uma corrente eléctrica é aplicada . Partículas de DNA maiores movem-se mais lentamente do que as partículas mais pequenas , de modo que o produto final é uma linha distinta de bandas visíveis em agarose , que criam uma impressão digital para as partículas serem testados . Etiquetas fluorescentes são normalmente utilizados para marcar partículas . Este visuais muitas vezes representa testes de DNA resulta em shows populares de televisão .
Eletroforese Capilar ( CE )
Esta técnica de separação utiliza um capilar para migrar partículas carregadas com a exclusiva proporções de raio contra um campo elétrico aplicado . Como rápido ou lento uma partícula move-se com esta técnica depende de sua velocidade iônica , e os resultados refletem isso tanto quanto os resultados de eletroforese em gel de ilustrar tamanho de partícula. A matriz CE também consiste em um electrólito – muitas vezes uma solução aquosa de tampão – e UV ou marcadores fluorescentes são utilizados . A técnica relacionada, eletroforese capilar de zona (CZE) , é estritamente limitado a separação composto iônico .
Dieletroforese (DEP)
Considerando eletroforese em gel e CE usar corrente elétrica para mover partículas carregadas , dieletroforese (DEP) utiliza frequências de rádio para separar as células com diferentes polarizabilidades . As células respondem de acordo com suas características únicas; partículas de constituição genética semelhante e /ou forma geométrica responder claramente o suficiente para os investigadores a distingui-los. As células se movem através de um gradiente de campo elétrico quando uma força é aplicada dieletroforética . Esta técnica é inovadora porque não exige partículas a serem rotulados e células podem ser utilizadas para um estudo mais aprofundado , após isolamento e recuperação.
