Como configurar experimentos de RMN 3D

experimentos de RMN tridimensionais são uma expansão de experimentos de RMN bidimensionais , e são usados ​​para atribuir ressonâncias à proteína inflamatória , C5a . Esta proteína é um componente poderoso da resposta inflamatória do corpo . A resposta inflamatória desempenha um papel em certas doenças crónicas tais como artrite reumatóide, gota , síndroma do intestino irritável e lúpus . Experiências tridimensionais permitirá aos cientistas estudar sistemas maiores onde a proteína está presente de maneiras que não podem ser estudados utilizando o método bidimensional. Experiências tridimensionais vêm em duas categorias: experimentos bidimensionais após o outro e experiments.Things ressonância triplos que você precisa
Espectrômetro de Ressonância Magnética Nuclear com estação de trabalho de computador
Protein amostra
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Coloque a amostra de proteína no magneto supercondutor no Espectrômetro de Ressonância Magnética Nuclear ( RMN ) , inserindo-o na sonda de RMN. Em seguida, coloque a sonda de RMN no orifício do magneto supercondutor.
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Usando a estação de trabalho de computador de Ressonância Magnética Nuclear, sintonizar o Espectrômetro de Ressonância Magnética Nuclear ( RMN ) para sua amostra para uma experiência bidimensional. Use " mtune " para ajustar e dar o melhor mergulho em seus resultados.
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Bloqueio e calço do espectrômetro para proporcionar a melhor forma de resolução e linha em sua amostra.

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Determine o 1H e 13C pw para a amostra e atribuir sensibilidade de 90 para experimentos bidimensionais. Para fazer isso, o carregamento no 1D e experiência 1H próton e sintonia e calçar a amostra D1 = 10. Digite pw90 ? no computador na estação de trabalho de computador para obter o valor padrão. Para todas as experiências de RMN , as amostras de proteína mais concentrados requerem menos verificações .
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Inserir um tempo de evolução indirecto adicional e uma segunda mistura para a experiência de duas dimensões para criar uma experiência tridimensional . Faça isso após a primeira mistura e antes da aquisição de dados final. O cronograma para a experiência tridimensional deve ser a seguinte : preparação , evolução, tempo de mistura , evolução, tempo e detecção mistura
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Repita as etapas para cada amostra de proteína que você deseja testar , fazendo . Certifique-se de adicionar no tempo adicional evolução indireta e segundo a mistura de cada vez para criar a experiência tridimensional.