Método Swab para recuperar Coliformes

O método cotonete pode ser usado para recuperar coliformes ( em forma de bastonete , Gram- negativas, não forma esporos de bactérias que podem produzir gás quando fermentar a lactose ) . Presença de coliformes é um bom indicador de bactérias patogénicas dentro de uma amostra . Eles durar um pouco mais em amostras tanto sólidos e líquidos do que as bactérias patogênicas e podem ser facilmente identificados através de suas características . Eles são geralmente encontrados apenas em trato intestinal de humanos e animais , não em alimentos , solo ou água. Uma das mais conhecidas é coliformes E. coli.There são três testes para determinar contagem de coliformes : presumíveis , confirmadas, e concluída. Coleta possíveis Coliformes

compressas estéreis podem ser usados ​​para coletar possíveis coliformes de amostras sólidas , tais como alimentos.

Para amostras mais sólidas , tais como alimentos , compressas são uma boa ferramenta para a recuperação de qualquer coliformes na amostra . A haste pode ser inserida na amostra de alimentos directamente ou a amostra pode ser triturados antes da raspagem . Para o teste presuntivo , o cotonete é então colocada num tubo contendo caldo de lactose e um tubo de Durham . Geralmente este teste é feito em triplicado , ou seja, três cotonetes serão utilizados na amostra e colocada em tubos individuais . Para testar líquidos , pipetando uma determinada quantidade da amostra para dentro do tubo é preferido para o método do esfregaço.

Presuntivo Teste

O teste presuntivo olha para a presença de gás no tubo . Como os possíveis coliformes quebrar , o gás lactose é emitida como um produto e ele é preso dentro do tubo de Durham . Ausência de gás indica que não há coliformes presentes na amostra testada . Um resultado positivo seria bolhas de gás , após 24 horas de incubação; se bolhas de gás só são vistos depois de 48 horas , isto é considerado um resultado positivo duvidoso . O gás pode não ser devido a coliformes e é necessário mais testes.

Confirmado

Em uma placa EMB , o crescimento bacteriano verde brilhante é um forte indicador de E. coli .

Uma placa eosina azul de metileno ( EMB) é listado com ambos os aspectos positivos e os caldos positivos duvidosos a partir do teste presuntivo . Uma placa EMB negativo terá colónias cor de rosa e pode indicar que o gás visto no teste presuntivo não foi devido a coliformes mas outros tipos de bactérias . Uma placa EMB positivo terá colônias verdes roxo ou brilhantes; isto confirma que os coliformes podem ser na amostra .

Completado

colónias da placa EMB positivas foram repicadas e cultivadas em caldo de lactose , assim como sobre um plano inclinado de agar nutriente . O teste Completado doublechecks os resultados dos caldos de lactose anteriores . Após uma incubação de 24 horas, as bactérias da inclinação agar nutriente estão manchadas com o Gram . Se as bactérias são gram – que será cor de rosa; se eles são Gram + eles aparecerão roxo. Se os organismos presentes são Gram – , têm uma forma haste quando olhou ao microscópio , e também produziu gás no caldo lactose, então a recuperação de coliformes foi bem sucedida

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