Como é o ADN recombinante Formada

? ADN recombinante é o produto de combinação de ADN a partir de dois organismos diferentes . As enzimas de restrição são enzimas bacterianas que catalisam a clivagem da molécula de ADN e são vulgarmente utilizados no processo de tomada de ADN recombinante . DNA de um organismo é introduzido no genoma de outro organismo , resultando em um genoma recombinante que irá expressar proteínas a partir de ambos os organismos . A transformação bacteriana é muitas vezes usado na produção de ADN recombinante . O processo envolve quatro passos fundamentais . Isolamento de ADN

ADN deve ser isolado a partir do dador e do vector .

O primeiro passo é isolar o vector e DNA dadora . Se o dador é uma bactéria , o ADN genómico principal será isolado . Se é um eucariota , o DNA nuclear é isolado. O vector de ADN é normalmente um plasmídeo bacteriano . Os plasmídeos têm de ser separados a partir de ADN genómico bacteriano; isto é geralmente feito por centrifugação .

corte

ADN As enzimas de restrição são utilizadas para cortar o DNA em fragmentos .

As enzimas de restrição são produzidos por bactérias para proteger contra a infecção por vírus . Estas enzimas actuam como tesouras , cortando o ADN em sequências de nucleótidos alvo . As enzimas de restrição cortar DNA em fragmentos pequenos o suficiente para ser usado na clonagem com fins pegajosa que permitem a junção do vetor e do DNA do doador.

Juntando DNA

Vector DNA e DNA do doador são unidos por mistura.

O doador eo DNA vetor são combinados. A enzima DNA ligase de ligar-se às extremidades coesivas do dador e do ADN de vector através da criação de ligações fosfodiéster entre os esqueletos de fosfato dos dois tipos de DNA .

Amplificação de DNA recombinante

DNA Recombinante moléculas são , por vezes, replicados num hospedeiro bacteriano .

o vector de plasmídeo contendo o DNA dadora pode introduzir uma célula bacteriana por meio de transformação simples . A transformação ocorre quando uma célula bacteriana leva -se o ADN a partir do meio ambiente e que incorpora no genoma do hospedeiro . Em seguida , o vector , juntamente com o ADN dador , será replicado pela célula bacteriana , juntamente com o seu genoma . Desta forma, o DNA recombinante é amplificado.