Método simples de derramamento placas de ágar

placas de Agar são componentes experimentais padrão utilizado muito rapidamente em laboratórios de biologia molecular . Eles são usados ​​para colónias de cultura de microorganismos , tais como bactérias , como a E. coli . Existem muitas variedades de placas de agar , dependendo das espécies do microorganismo a ser cultivadas e a presença de alterações genéticas ( por exemplo, resistência aos antibióticos ) . Pesar Ingredientes

Usar um laboratório balança, medir bacto – triptona (10 g) , extrato de levedura (5 g) , cloreto de sódio (5 g) e agar por laboratório ou de grau de pesquisa . Usando graduado provetas graduadas ou uma pipeta , medir 1 ml de hidróxido de sódio 1N . Manuseio estéril não é necessária , de forma que estes passos podem ser realizados numa bancada de laboratório normal. Esta receita é um caldo de Luria e padrão de base , rotineiramente usado para fazer placas de agar , e não contém quaisquer suplementos . Existem outras variações deste caldo , mas o correto que sustenta o crescimento do microorganismo específico deve ser usado.

Compõem a Agar

Adicionar os reagentes em pó em um 1l (ou maior ) frasco autoclavável com fundo plano , em seguida, adicionar o hidróxido de sódio. Encha com água destilada estéril, para fazer um litro de mistura . Para 500 ml deste meio , adicionar 7,5 g de agar e autoclave. Refresque-se em banho- maria regulado a 50 graus C. A partir de agora , cada passo deve ser realizado em condições estéreis , por isso o trabalho em uma capa de contenção ou sob uma chama. Se os suplementos , como antibióticos ou agentes de crescimento precisam ser adicionados , filtro de esterilizar estes e adicione aos meios de comunicação . Não adicione a mídia que ainda não foi resfriado , como o calor irá destruir os suplementos.

Prepare as placas de Petri ( placas )

Enquanto o mídia está esfriando , configurar as placas , levando-os para fora de sua embalagem ( manga ) , removendo suas tampas e rotular o fundo das placas com o tipo de caldo (mídia) , bem como o suplemento que contém. Além disso , é essencial para escrever a data em que a placa foi feita, eo nome da pessoa que está fazendo isso.

Despeje a Agar

Enquanto o agar é fluida ( melhor entre 45 e 50 graus C ) , o uso de luvas de protecção térmica e despeje cerca de 15 ml de caldo de agar para o centro da placa e de permitir que este alcance a não mais do que uns poucos centímetros a partir do topo da placa . Permitir que o ágar se espalhar por si só mas não agitar as placas ou suportes muito, pois quaisquer bolhas no meio fluido solidifica na placa de agar . Continuar vertendo o resto das placas . Uma vez derramado , deixe as tampas das placas , que lhes permitam consolidar , em seguida, recoloque a tampa , vire as placas de cabeça para baixo sobre as pálpebras , e empilhá-los de volta para suas embalagens.