Cytospin Protocolo
Cytospinning é um método usado por microbiologistas para obter células prontas para visualização microscópica. Protocolo cytospin é uma padronização passo -a-passo dos procedimentos cytospinning e faz parte do processo de investigação médica e biológica em todo o mundo . Cytospin Preparação
Em primeiro lugar, diluir as células com tampão fosfato salino (PBS) ou solução salina , com cerca de 500 mililitros de solução para cada 25.000 células. Em seguida, preparar a centrífuga através da inserção , selagem e fixação de slides, com as lâminas voltadas para fora , não dentro.
Cytospin Ação
Em seguida, células de carga e colocá-los em nível de velocidade de 10 por quatro minutos , ou nível de 13 por seis minutos para células menores . Depois de retirada a solução salina a partir de cada lâmina , adicionar uma quantidade igual de 4 por cento de cinzas de combustível pulverizado ( PFA ) , um conservante , para preservar as células . Em seguida , repita o ciclo de centrifugação .
Cytospin Cleanup
Em seguida, lavar cada lâmina com uma solução salina duas vezes. Use uma caneta especial chamado de ” caneta pap ” para fazer quadrados em torno das células . Finalmente, manter as células úmidas com mais solução salina e deixe descansar em câmara úmida a 4 graus Celsius até que você precisar deles.
