Estágios de DNA recombinante

Uma única fita de DNA contém toda a informação genética expressa por um organismo vivo. ADN recombinante , por outro lado , refere-se a duas cadeias de ADN a partir de dois organismos diferentes serem combinadas para criar uma nova cadeia de ADN . Muitos cientistas estudar o DNA recombinante para ajudar a fazer descobertas que iria avançar o progresso da agricultura, medicina e terapia gênica. Cientistas empregar três fases gerais para a produção de ADN recombinante . Isolamento

A primeira fase da tomada de DNA recombinante é selecionar uma fita de DNA deve ser inserida no vetor. O vector é uma molécula de ADN independente, que cientistas usar apenas como um recipiente para transferir material genético novo para outra célula. A cadeia de DNA que o cientista escolhe para injetar no vetor depende de que tipo de célula seria mais apropriado para o respectivo projecto científico, mas os fios são geralmente de uma célula de bactéria ou um gene humano.

Vector

a finalidade da segunda etapa é preparar o vetor para o processo de formação recombinante. Este passo envolve o corte de um pedaço de DNA com uma enzima de restrição , ligando a cadeia de ADN e inserção do cordão no vector com a ADN-ligase . Normalmente, a inserção também contém um marcador definitivo para permitir aos cientistas distinguir mais facilmente , e identificar as moléculas recombinantes durante a transformação . Existem muitos marcadores diferentes , e cada marcador produz efeitos diferentes . Assim , os cientistas podem selecionar um marcador que é apropriado para o estudo particular que está sendo conduzida.

Formação

A fase final envolve o cientista inserir o vetor em um célula hospedeira que tenha sido cuidadosamente preparado para aceitar o DNA estranho . A célula hospedeira pode ser uma célula bacteriana tal como E. coli . Como o ADN recombinante é formado , o cientista incuba o vector e o DNA do hospedeiro em conjunto no que é conhecido como o processo de transformação . Ao utilizar os marcadores , o cientista pode identificar quais as células assumiram o DNA estranho .

Métodos

O método de transformação refere-se a formação de DNA recombinante , usando uma célula de bactéria – E. coli – como uma célula hospedeira . No entanto , outros métodos de formação de ADN recombinante utilizar os mesmos passos, mas não usam células de bactérias para as células hospedeiras . Por exemplo , a transformação não bacteriana apresenta os mesmos passos do que o método de transformação, mas com uma célula não bacteriana que serve como a célula hospedeira . As células humanas são normalmente utilizados para a engenharia genética ou a clonagem projetos de pesquisa. Além disso , a introdução de fago , ou o processo de transfecção , é um equivalente do método de transformação , excepto um fago é utilizada como a célula hospedeira em vez de bactérias .