O Efeito de Trypan Blue em microcarregador

Trypan azul é um método biológico para quantificar a viabilidade das células , ou para separar as células vivas de células mortas depois cultivá-las em meios de comunicação. Muitas células animais precisam de ser cultivadas numa superfície , tal como um microtransportador , que é um polímero spherelike exclusivamente concebido para facilitar esta aplicação . Coloração com azul de tripano tem nenhum efeito sobre os grânulos , mas facilita a separação do material de revestimento a partir de células não viáveis ​​. Microtransportador Protocolo

De acordo com a publicação GE Healthcare ” Cultura celular microtransportador , ” uma amostra de cultura de células crescidas em microsuportes é colocada num tubo de ensaio e deixou-se assentar . O meio é decantado e substituído com uma solução de tripsina e de cálcio . O tubo é incubado , com agitação , os microtransportadores são deixadas a assentar e o meio é transferido para um segundo tubo . Os microtransportadores no primeiro tubo foram lavadas e , em seguida, reunidas com o sobrenadante do segundo tubo . A suspensão é centrifugada , ou centrifugada , e o sobrenadante é descartado . Trypan azul mancha é adicionado para marcar a célula morta e fragements celulares , e contagens de células viáveis ​​podem ser feitas.

Culturas de células endoteliais

A adição de microcarriers para culturas de células é valiosa para o estudo da biologia das células endoteliais , de acordo com um primeiro estudo que descreve este processo em questão em Fevereiro de 1984 ” Laboratory Investigation . ” Os investigadores sugeriram um método para a selecção de células endoteliais a partir de culturas celulares mistas utilizando microveículos em uma técnica de transferência de migração . Resumidamente , microportadores foram adicionados às culturas celulares como um quadro , em que as células podem se multiplicar . A fim de separar as células , mancha azul de tripano foi adicionado . A mancha não atribuiu às contas microcarregador e fez a seleção de células possíveis . Além disso , os autores descobriram que a mancha azul de tripano ligado apenas para as células mortas e os fragmentos celulares . Assim, as células que não mancham eram viáveis ​​.

Identificação de Viabilidade celular

Um artigo publicado na edição de ” histoquímica e Biologia Celular dezembro 1995 ” descrito um novo sistema para identificar as células envolvidas na angiogénese , que é a criação de novos vasos sanguíneos , como visto na formação de tumores . Os investigadores desenvolveram um sistema de cultivo com base em microtransportador que utiliza coloração com azul de tripano . Este processo permitiu aos pesquisadores observar as características de crescimento de vários tipos de células. Coloração com azul de Trypan só aumentou a observação e não tem qualquer efeito sobre as microcarriers .

Diferentes mídias

Um estudo publicado na edição de ” Citotecnologia ” Março de 2001, detalhou o caracterização do crescimento celular e morte em dois tipos de meios de comunicação que utilizam microtransportadores e coloração com azul de tripano . Os resultados deste estudo indicaram que a coloração com azul de tripano foi conseguida utilizando dois meios . O estudo concluiu que a coloração com azul de tripano e a utilização de microtransportadores não foi possível determinar se a morte celular foi devido a apoptose, ou morte celular programada geneticamente , ou necrose , o qual descreve a morte de tecido por outros meios .