Como identificar bactérias Gram Usando Stain
A coloração de Gram é um método de coloração diferencial usado no ambiente de laboratório de microbiologia clínica para identificação de bactérias que possui uma membrana celular externa de espessura ou uma membrana celular externa fina . As soluções químicas utilizadas no método de coloração de Gram lhe permitirá identificar se a bactéria é Gram positivo ( membrana celular de espessura ) ou Gram negativo ( membrana celular fina). Saber se as bactérias Gram é positivo ou Gram negativo lhe permitirá determinar as espécies de bactérias , as características da doença as causas bactérias e os antibióticos necessários para matar os bacteria.Things você precisa
Bico de Bunsen
rack
microscópio pré- limpas desliza
bacterianas espécime
solução violeta de cristal
água destilada
solução de iodo de Gram
Acetona
solução de safranina para contraste
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1
Heat- fixar as bactérias para uma lâmina de vidro . Transferir as bactérias a partir de uma amostra de urina coletada utilizando um cotonete estéril ou inoculando loop. Espalhe as bactérias em uma lâmina de vidro pré- limpo. Aqueça o deslizar sobre um queimador de Bunsen chama por alguns segundos para fixar a bactéria para o slide. Coloque o slide em um rack sobre uma pia .
2
Despeje cinco a 10 gotas de solução de cristal violeta para a lâmina de vidro e aguarde cerca de um minuto. Isso vai manchar o violeta bactérias.
3
Lavar a lâmina fora de usar água destilada. Despeje 5 a 10 gotas de solução de iodo de Gram no slide e aguarde um minuto . Solução de iodo de Gram irá apor a mancha de cristal violeta para as bactérias se as bactérias tem uma membrana celular de espessura.
4
Lavar solução de iodo de Gram fora de usar água destilada. Despeje cinco a 10 gotas de acetona e esperar cerca de 10 segundos. A acetona irá remover mancha de cristal violeta a partir de bactérias com paredes celulares finas , mas não irá remover a solução de cristal violeta a partir de bactérias com paredes celulares espessas.
5
Despeje cinco a 10 gotas de solução contrastante safranina no vidro deslizar e aguarde um minuto . A safranina vai manchar a parede celular das bactérias vermelhas se a mancha de violeta cristal foi removido usando a acetona.
6
Lavar a solução de safranina com água destilada. A- paredes de células finas bactérias irá reter a solução de safranina . A bactéria- células de paredes espessas ainda vai manter a mancha de violeta cristal , então a solução de safranina será lavada .
7
Coloque o slide sob o microscópio sob imersão em óleo e observar as bactérias. Bactérias Gram-positivas aparecerão violeta enquanto as bactérias Gram- negativas aparecerá vermelho.