Fatores que Afetam a eletroforética Fenômenos

Eletroforese é um fenômeno onde as partículas carregadas migrar na presença de um campo elétrico . Os biólogos usar electroforese para separar e identificar moléculas biológicas tais como proteínas, ácidos nucleicos e aminoácidos que existem quer como aniões ou catiões . Vários factores , tais como o tamanho molecular e forma , o pH do meio de electroforese e as características do campo eléctrico aplicado , afectar a migração destas porções carregadas . Características moleculares

O tamanho e forma das moléculas biológicas influencia a taxa de migração . Como uma proteína aumenta de tamanho , a sua taxa de migração diminui por causa das forças de atrito no meio de tampão de electroforese. Proteínas globulares exibem uma taxa de migração diferente da de proteínas fibrosas . Uma carga de molécula depende da sua dissociação em que o pH da solução tampão utilizada . Como a carga aumenta de uma molécula , a sua taxa de migração também aumenta.

Buffer Propriedades

Os íons do buffer utilizado na corrida eletroforética conduzir a corrente aplicada entre o cátodo eo ânodo . As proteínas presentes na amostra interage com os iões do tampão dependendo do pH do tampão . Esta interacção afecta a taxa de migração de moléculas de proteína . Os tampões com elevadas forças iónicas causar um aumento na corrente , o que produz uma grande quantidade de calor e de redução da taxa de migração da proteína . Amortecedores com baixa força iônica levar a problemas na difusão de proteínas; isso prejudica a separação das bandas eletroforéticas .

campo elétrico Características

A migração de proteínas depende das características do campo elétrico que é aplicado à amostra disperso no buffer . Para uma determinada tensão , a corrente que passa através do meio de electroforese depende do gradiente de potencial e a resistência do meio . À medida que os potenciais aumentos de gradiente , a migração da proteína acelera . À medida que o comprimento do meio de electroforese de proteínas que atravessam aumenta, proteínas encontra maior resistência . Isto dificulta a migração de proteína .

Efeitos de temperatura

O tempo necessário para a separação dos componentes da amostra é proporcional à tensão aplicada ao meio . Um aumento da tensão aumenta a velocidade de migração . No entanto , as tensões elevadas geram uma quantidade excessiva de calor . O aumento da temperatura altera a viscosidade e a condutividade eléctrica do meio de electroforese. Isso afeta a taxa de migração também. As mudanças de temperatura podem também provocar uma alteração na conformação de proteínas , o que reduz a velocidade de migração e a eficiência de separação electroforética .