Como congelar cristais de proteínas
cristais de proteínas são congelados , a fim de estudar melhor a sua estrutura em laboratórios de ciências . Cristais de proteínas são muito frágeis e congelá-los fornece mais força e proteção , enquanto eles estão sendo testados . As proteínas são uma parte essencial do corpo humano e estão a ser estudadas de modo a entender melhor o conceito de dobramento de proteínas , bem como as outras funções de proteína . Isso pode , eventualmente, ser útil no campo da medicina para criar melhores medicamentos e tratamentos para problemas nos body.Things humanos que você vai precisar
cristais de proteínas produzidas por
experimentação de raios-X tubo
Cryo -agent ( etilenoglicol ou paratone -N)
Freezer
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Use cristais de proteínas que tenham sido produzidos e recolhidos para efeitos de experimentação. Verifique se os cristais difratar à temperatura ambiente através da geração de raios-x do cristal em um tubo de raio – x . Interpretando os dados envolve a atribuição de índices para cada reflexão para ver o padrão de difração. Os cristais podem ser rotulados como mosaico múltiplo , mosaico, única ou múltipla .
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Selecione um crio- agente, como paratone -N ou etileno glicol, para congelar quimicamente as proteínas . Determine a concentração da solução correta para congelar as proteínas. Uma solução de 100 % de etileno glicol é um crio- agente comum em muitos laboratórios .
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Soak cristais nesta solução . Se os cristais são estáveis em seguida, teste para ver quanto tempo eles permanecem estáveis. Cristais que se mantenham estáveis por longos períodos de tempo , como vários dias , são mais úteis do que os cristais que se tornam instáveis rapidamente. Se os cristais são instáveis , flash congelar imediatamente no congelador e de teste utilizando o método de difracção de raios – x discutido anteriormente . Cristais que desenvolvem rachaduras , curvas, depressões ou outras variações na aparência não são estáveis .
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Teste a difração dos cristais estáveis. Verifique se difracção de todos os cristais congelados é tão boa como à temperatura ambiente . Se a difração é a mesma qualidade , em seguida, os cristais podem ser usados imediatamente ou armazenada em um freezer .
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Deixe de molho por um período mais curto de tempo, se os cristais não difratar bem . Tente outro agente crio se o tempo de imersão mais curto não funciona. Uma vez que a difração é de boa qualidade os cristais podem ser flash congelados para uso posterior.