Produtos químicos utilizados na Análise de DNA
A análise de DNA envolve diferentes tipos de experimentos moleculares e procedimentos biológicos. O DNA é uma matéria-prima frágil e complicada , de modo que o manuseamento e a análise requer a melhor qualidade mais pura e preparação de produtos químicos . Dependendo da análise , centenas de produtos químicos , a partir de soluções ácidas e básicas de tampões e corantes , estão envolvidos no estudo do ADN . Entender por que alguns produtos químicos são utilizados é fundamental para a realização de experimentos de sucesso e obter resultados precisos , confiáveis e reprodutíveis . Etilenodiaminotetraacetato de Purificação de DNA
três tipos de ADN são purificadas para o trabalho científico : ADN do genoma ( ADN genómico ) , todo o DNA da célula ( ADN total ) ou a partir de plasmídeos , que podem auto multiplicar . Purificação de DNA total celular utiliza produtos químicos que permitem a destruição de muitas membranas de uma célula durante a lise celular . O etilenodiaminotetracetato química (EDTA) é frequentemente usado para tirar íons de magnésio , que são necessários para manter a rigidez das paredes das células , fazendo com que estes se enfraquecer ao ponto que eles entram em colapso ou ruptura , liberando conteúdos e DNA da célula para análise. Além disso , o EDTA protege e preserva a integridade do DNA através da inibição de enzimas que estão normalmente presentes na célula , o que pode fragmentar o ADN e inutilizá-lo .
Magneisum Cloreto de Amplificação de ADN
a reacção em cadeia da polimerase ( PCR ) é um método de análise sofisticada utilizado para amplificar vários milhares de cópias de uma molécula de ADN , no entanto , que é cheio de problemas técnicos e imprecisões . Muitos cientistas , pois, rotineiramente vários conjuntos diferentes de PCR para localizar a condição mais óptima e os parâmetros para um determinado gene de interesse . Um produto químico utilizado para realizar uma tal optimização é o magnésio , o que estabiliza a enzima polimerase do ADN usado no PCR e actua como um co – factor essencial para a actividade da enzima . Para PCR , o magnésio é utilizado sob a forma de um tampão de cloreto de magnésio .
De brometo de etídio para coloração de ADN
O brometo de etídio é um corante que se liga ao DNA por deslizamento entre os nucleótidos que formam uma dupla hélice de ADN , num processo conhecido como intercalação . Este corante pode ser iluminado com uma lâmpada de luz ultravioleta , de modo que o ADN ao qual o brometo de etídio foi ligado pode ser visualizado . No entanto , pelo menos de 1 nanograma de DNA é necessária para o brometo de etídio para ser vista adequadamente , portanto, é uma forma de detecção de ADN amplificado por PCR . Apesar de barato e amplamente utilizado , também é um produto químico mutagênico conhecido por causar câncer , por isso seu uso em laboratórios é altamente regulamentado e muitos cientistas estão se movendo para o uso de alternativas menos tóxicas.
