O CTAB Extração Protocolo
Os compostos químicos cetyltrimethylammonium , brometo hexadeciltrimetilamônio , brometo cetrimônio e brometo palmityltrimethylammonium são todos conhecida também como CTAB . O produto químico é usado como um tampão de extracção de ADN do genoma – sequenciação , especialmente a partir de plantas . CTAB Receitas buffer
As quantidades dos vários produtos químicos em receitas para tampão CTAB diferem pelo laboratório. No entanto , todos os ingredientes incluem 1 M Tris-HCl pH 8,0 , 0,5 M de EDTA , 5 M de NaCl e H2O ( por vezes duas vezes destilada ) . Para a componente de CTAB , alguns laboratórios utilizam brometo de cetiltrimetilamónio , brometo de uso e alguns hexadeciltrimetilamónio .
Planta Tissue Preparação
Preparação do tecido da planta pode variar dependendo do material . As paredes celulares e membranas devem ser discriminados ao acessar o material nuclear sem qualquer degradação . Normalmente, a moagem do material vegetal com nitrogênio líquido permite o acesso ao DNA , mantendo enzimas celulares nocivos e produtos químicos inativo.
Suspensão e Centrifugação
O tecido solo é suspenso no tampão CTAB e colocar num banho de água circulante . Em seguida , mistura-se com clorofórmio e centrifugado para separar as proteínas solúveis e outros materiais . O DNA é então precipitado a partir da fase aquosa e cuidadosamente lavados para remover os sais contaminantes . O DNA purificado é então suspenso e armazenadas em tampão TE ou água destilada estéril.
